開發(fā)SDHI類殺菌劑的鼻祖是美國有利來路公司(歷經(jīng)科聚亞、愛利思達,現(xiàn)歸UPL),1966年,該公司率先上市了該類殺菌劑中的首個產(chǎn)品萎銹靈；1974年,殼牌(現(xiàn)拜耳)上市了甲呋酰胺……目前,參與開發(fā)的公司有10余家,上市產(chǎn)品有20多個。

       迄今,國際殺菌劑抗性行動委員會(FRAC)共列出了24個SDHI類殺菌劑,其中包括先正達的5個產(chǎn)品(吡唑萘菌胺、氟唑環(huán)菌胺、苯并烯氟菌唑、氟唑菌酰羥胺、cyclobutrifluram)、拜耳的5個產(chǎn)品(甲呋酰胺、聯(lián)苯吡菌胺、氟吡菌酰胺、氟唑菌苯胺、isoflucypram)、巴斯夫的3個產(chǎn)品(麥銹靈、啶酰菌胺、氟唑菌酰胺)、美國有利來路的2個產(chǎn)品(萎銹靈、氧化萎銹靈)、住友化學的2個產(chǎn)品(呋吡菌胺、inpyrfluxam)、日本農(nóng)藥的2個產(chǎn)品(氟酰胺、聯(lián)苯吡嗪菌胺)、組合化學的1個產(chǎn)品(滅銹胺)、日產(chǎn)化學的1個產(chǎn)品(噻呋酰胺)、三井化學的1個產(chǎn)品(吡噻菌胺)、石原產(chǎn)業(yè)的1個產(chǎn)品(異丙噻菌胺)、意賽格的1個產(chǎn)品(氟茚唑菌胺,現(xiàn)被富美實收購)。

表1  FRAC列出的24個SDHI類殺菌劑(按上市時間排序)

       FRAC將SDHI類殺菌劑歸類為C2組,并按化學結(jié)構(gòu)將該類產(chǎn)品分成了12個小組,分別為：(1)苯基苯甲酰胺類化合物：麥銹靈、氟酰胺、滅銹胺；(2)噻吩酰胺類化合物：異丙噻菌胺；(3)吡啶乙基苯甲酰胺類化合物：氟吡菌酰胺；(4)苯基環(huán)丁基吡啶酰胺類：cyclobutrifluram；(5)呋喃酰胺類化合物：甲呋酰胺；(6)氧硫雜環(huán)己二烯酰胺類化合物：萎銹靈、氧化萎銹靈；(7)噻唑酰胺類化合物：噻呋酰胺；(8)吡唑-4-酰胺類化合物：苯并烯氟菌唑、聯(lián)苯吡菌胺、氟茚唑菌胺、氟唑菌酰胺、呋吡菌胺、inpyrfluxam、吡唑萘菌胺、氟唑菌苯胺、吡噻菌胺、氟唑環(huán)菌胺；(9)N-環(huán)丙基-N-芐基-吡唑-4-酰胺類化合物：isoflucypram；(10)N-甲氧基-N-苯乙基-吡唑-4-酰胺類化合物：氟唑菌酰羥胺；(11)吡啶酰胺類化合物：啶酰菌胺；(12)吡嗪酰胺類化合物：pyraziflumid。

       不同的SDHI類殺菌劑,其殺菌譜存在差異,這與分子中雜環(huán)種類、雜環(huán)上取代基及取代位置存在關(guān)聯(lián)。SDHI類殺菌劑的快速崛起,直接受益于新近研發(fā)和上市的一批性能優(yōu)異的產(chǎn)品,這些產(chǎn)品大多誕生于對原有已商品化產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)改造和優(yōu)化。

       酰胺類殺菌劑并非都是琥珀酸脫氫酶抑制劑,但目前上市的所有琥珀酸脫氫酶抑制劑都是酰胺類,″酰胺″成為琥珀酸脫氫酶抑制劑的重要特征之一。研究人員圍繞官能團″酰胺″的羧酸部分、酰胺鍵部分、胺部分,通過變換取代基,開發(fā)了大量的化合物,從而推動SDHI類殺菌劑迭代升級,提高了生物活性,擴大了防治譜。其中,雜環(huán)和氟原子的引入貢獻很大。

圖1  SDHI類殺菌劑的結(jié)構(gòu)通式

       從FRAC列出的SDHI類殺菌劑來看,其羧酸部分主要為氧硫雜環(huán)己二烯、吡啶、苯基、呋喃、噻吩、噻唑、吡唑、吡嗪等,它們大多為雜環(huán),其中尤以吡唑環(huán)的引入,大大提升了產(chǎn)品活性。目前市場領(lǐng)先產(chǎn)品及增長較快的產(chǎn)品大多來自吡唑酰胺類化合物,如氟唑菌酰胺、苯并烯氟菌唑、氟唑菌酰羥胺等。最近,日本農(nóng)藥株式會社在羧酸部分通過引入吡嗪結(jié)構(gòu),推出性能優(yōu)秀的聯(lián)苯吡嗪菌胺,進一步豐富了羧酸部分的可優(yōu)化內(nèi)涵。

       由于氟原子具有模擬效應、電子效應、阻礙效應、滲透效應等特性,因此氟的引入,有時可使化合物的生物活性倍增。在SDHI類殺菌劑的羧酸部分大多會引入氟原子,以改善產(chǎn)品的穩(wěn)定性、親脂性、酸堿性、構(gòu)型等。研究表明,二氟甲基取代的化合物的活性優(yōu)于三氟甲基,這主要由于二氟甲基的引入,可與D_D90氨基酸殘基形成氫鍵或形成分子內(nèi)氫鍵,使得其與琥珀酸脫氫酶的結(jié)合自由能優(yōu)于三氟甲基。

       一直以來,酰胺鍵部分較為保守,但近年來開發(fā)的2個產(chǎn)品(氟唑菌酰羥胺、isoflucypram)在其N原子上進行了取代,收到了不同凡響的效果。它們的殺菌譜更加廣泛,生物活性顯著提高。

       與羧酸部分類似,胺部分的結(jié)構(gòu)改造也較為豐富。從已知的SDHI類殺菌劑來看,胺部分的取代包括：聯(lián)苯(如啶酰菌胺、氟唑菌酰胺、聯(lián)苯吡菌胺、pyraziflumid等)、稠環(huán)(吡唑萘菌胺、苯并烯氟菌唑、氟茚唑菌胺、inpyrfluxam等)、橋鏈(氟吡菌酰胺、異丙噻菌胺等)、苯基(氟唑環(huán)菌胺、氟唑菌苯胺、噻呋酰胺等)、其他雜環(huán)(吡噻菌胺、pyraziflumid等)。研究人員總結(jié)出胺部分結(jié)構(gòu)優(yōu)化主要采用的三大策略：并環(huán)策略、聯(lián)苯策略、增長鏈長策略等。

       縱觀現(xiàn)有的SDHI類殺菌劑,有些結(jié)構(gòu)優(yōu)化是具有里程碑意義的重大突破。

       (1)萎銹靈--SDHI類殺菌劑的開山之作

       最早發(fā)現(xiàn)具有殺菌活性的芳酰胺結(jié)構(gòu)的化合物為水楊酸苯胺(salicylanilide)。此后,對擔子菌及立枯絲核菌等病原菌引起的病害具有較高活性的萎銹靈誕生,由美國有利來路于1966年推向市場,它是首個靶標琥珀酸脫氫酶的殺菌劑。氧化萎銹靈則是在萎銹靈的基礎(chǔ)上開發(fā)的,主要用于觀賞植物。

       萎銹靈不僅是SDHI類殺菌劑的開山之作,而且具有良好的內(nèi)吸性,它的上市開辟了殺菌劑從保護性向內(nèi)吸性方向發(fā)展的新賽道。萎銹靈主要作為種子處理劑,應用于谷物、果蔬、大豆、花生、水稻等作物領(lǐng)域,至今已服務農(nóng)業(yè)56年。2019年,萎銹靈的全球銷售額為3,400萬美元。

       萎銹靈是SDHI類殺菌劑可以追溯的源頭,它將酰胺結(jié)構(gòu)與琥珀酸脫氫酶抑制劑緊緊聯(lián)系在一起。盡管萎銹靈在理化性質(zhì)、生物活性等方面存在諸多局限,但它也為后續(xù)產(chǎn)品的研發(fā)留下了足夠的提升空間。

       (2)啶酰菌胺--SDHI類殺菌劑的助推器

       SDHI類殺菌劑是典型的慢熱型的產(chǎn)品,雖然萎銹靈1966年即已上市,但直到2009年,琥珀酸脫氫酶抑制劑才自成體系,并被FRAC單獨歸類。

       2003年上市的啶酰菌胺是SDHI類殺菌劑發(fā)展史上的重要里程碑,其2005年銷售額即突破1.00億美元,2014年達到峰值水平3.90億美元,并多年蟬聯(lián)SDHI類殺菌劑的榜首。2019年,啶酰菌胺的全球銷售額為3.78億美元,為SDHI類殺菌劑市場的第三大產(chǎn)品,在全球殺菌劑市場排名第14位。

       啶酰菌胺是第一個廣譜性的SDHI類殺菌劑,幾乎對所有類型的真菌病害都有效,具有優(yōu)異的預防作用,并有一定的治療效果。主要用于油菜、果蔬、谷物、葡萄、馬鈴薯、草坪、花生、咖啡、觀賞植物等,防治由子囊菌和半知菌引起的病害,如灰霉病、白粉病、早疫病、菌核病、褐腐病、葉斑病以及由鏈格孢菌等引起的病害等。

       啶酰菌胺的化學結(jié)構(gòu)實現(xiàn)了兩大突破,不僅在羧酸部分引入吡啶基,同時在胺部分引入空間位阻較大的聯(lián)苯基,化合物性能得以顯著提升。

       巴斯夫這一開創(chuàng)性的研究,使SDHI類殺菌劑得到了空前的發(fā)展,高效廣譜的新產(chǎn)品如雨后春筍般涌現(xiàn),成為該類殺菌劑實現(xiàn)快速增長的助推器。

       在SDHI類殺菌劑中,另一吡啶酰胺結(jié)構(gòu)的化合物為先正達即將上市的cyclobutrifluram。

       (3)吡唑酰胺類化合物--SDHI類殺菌劑中的最強陣容

       吡唑酰胺類化合物的功能不囿于殺菌劑,有的具有殺蟲和除草活性。尤其是吡唑-5-酰胺類化合物成為目前市場開發(fā)的熱門,如氯蟲苯甲酰胺、溴氰蟲酰胺、四氯蟲酰胺等。而SDHI類殺菌劑中的吡唑酰胺則是吡唑-4-酰胺,這類化合物占據(jù)了半壁江山,成為該類殺菌劑中的最強陣容。

       1997年,住友化學率先上市了吡唑-4-酰胺結(jié)構(gòu)的SDHI類殺菌劑呋吡菌胺；2009-2020年間,共有11個吡唑-4-酰胺類化合物上市,分別為：吡噻菌胺(2009)、聯(lián)苯吡菌胺(2010)、吡唑萘菌胺(2010)、氟唑環(huán)菌胺(2011)、氟唑菌酰胺(2012)、氟唑菌苯胺(2012)、苯并烯氟菌唑(2013)、氟唑菌酰羥胺(2017)、氟茚唑菌胺(2020)、inpyrfluxam(2020)、isoflucypram(2020)。其中,氟唑菌酰胺、苯并烯氟菌唑現(xiàn)已領(lǐng)軍市場。

       由于二氟甲基的極性和體積與羥基類似,可模仿蛋白質(zhì)、酶和某些物質(zhì)中的羥基而產(chǎn)生代謝阻礙效應,從而使化合物擁有優(yōu)良的生物活性。在FRAC列出的12個吡唑-4-酰胺結(jié)構(gòu)的SDHI類殺菌劑中,除呋吡菌胺、氟唑菌苯胺、吡噻菌胺外,其他9個化合物均在吡唑環(huán)的3-位上引入了二氟甲基基團。因此,吡唑-4-酰胺與3-二氟甲基的結(jié)合幾乎成為這類化合物的標配,也是科研人員在長期的結(jié)構(gòu)優(yōu)化中達成的共識。

       (4)氟吡菌酰胺--新型橋鏈結(jié)構(gòu)的SDHI類殺菌劑

       SDHI類殺菌劑的作用機理與抗性機理相似,FRAC將該類產(chǎn)品歸為同一交互抗性組。但研究發(fā)現(xiàn),在灰霉病菌、多主棒孢、瓜類白粉病菌等病原菌中,氟吡菌酰胺與啶酰菌胺之間并無交互抗性。更多的研究也發(fā)現(xiàn),氟吡菌酰胺的抗性機理與眾不同。

       氟吡菌酰胺為首個新型橋鏈雜環(huán)酰胺結(jié)構(gòu)的SDHI類殺菌劑(stretch heterocycle amide SDHIs, SHA-SDHI),與大多數(shù)SDHI類殺菌劑不同,其胺部分的N原子不是直接與芳基相連,而是首先與含2個C原子的烴基相連,形成了一個延長的橋鏈。正是這一新型橋鏈結(jié)構(gòu)的存在,使得氟吡菌酰胺突破了與琥珀酸脫氫酶固有的結(jié)合模式,導致其與萎銹靈、啶酰菌胺等普通SDHI類殺菌劑不存在交互抗性。

       這些研究結(jié)果表明,病原菌對SHA-SDHIs與普通SDHIs的抗性機理存在差異。一系列的研究證實,SDHC3為SHA-SDHIs的藥劑靶標,進而從分子角度揭示了″藥-靶″互作機理。

       類似氟吡菌酰胺抗性機理的還有異丙噻菌胺等,這一新的抗性機理的發(fā)現(xiàn)將為科研人員打開新的的創(chuàng)制思路。

       (5)氟唑菌酰羥胺--首次在酰胺鍵上實現(xiàn)突破

       早期的研究表明,SDHI類殺菌劑中的酰胺鍵較為保守。直到2017年先正達上市了氟唑菌酰羥胺,才顛覆了人們的認知。

       氟唑菌酰羥胺的酰胺鍵中N原子上進行了甲氧基取代后,產(chǎn)品性能更加優(yōu)秀。先正達指出,在所有化學類型的產(chǎn)品中,氟唑菌酰羥胺對葉斑病、白粉病的活性最高；其對難以防治的病害,如葡萄孢菌、核盤菌、棒孢菌等病原菌引起的病害也有較好的防效；還突破性地防治谷物上由鐮刀菌引起的病害,如赤霉病等。

       2020年,拜耳上市了isoflucypram,其酰胺鍵中N原子上進行了環(huán)丙基取代,從而賦予產(chǎn)品優(yōu)秀的性能,為谷物病害(如葉枯病等)防治樹立了新標桿。

       隨著研究的深入,保守的酰胺鍵不再保守,羧酸部分、胺部分的結(jié)構(gòu)優(yōu)化將持續(xù)活躍,SDHI類殺菌劑″酰胺″基團三大部分的結(jié)構(gòu)優(yōu)化仍大有文章可做,甚至會再放″衛(wèi)星″。