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重大突破!小麥產(chǎn)量性狀新基因被發(fā)現(xiàn),最高增產(chǎn)19.8%!

責(zé)任編輯:左彬彬 來源:iPlants 日期:2022-04-11

 

作為全球最重要的糧食作物之一,小麥滿足了人類20%的卡路里和蛋白質(zhì)需求,為全球超過三分之一的人口提供能量來源。受極端天氣條件和國際局勢影響,今年幾個主要出口國紛紛減產(chǎn)。聯(lián)合國糧農(nóng)組織數(shù)據(jù)顯示,今年小麥出口價格上漲了46%,全球食品價格已經(jīng)漲至10年來最高點(diǎn),明年小麥價格將繼續(xù)飆升并加劇全球食品通脹,提高小麥產(chǎn)量是直接關(guān)系到世界糧食安全的重大問題。小麥產(chǎn)量受三個主要因素的影響:單位面積穗數(shù)、粒重和每穗籽粒數(shù),其中單位面積穗數(shù)受分蘗數(shù)影響,每穗籽粒數(shù)由小穗數(shù)(SNS)和小穗籽粒數(shù)決定。


2022年4月8日,Science雜志在線發(fā)表了來自俄克拉荷馬州立大學(xué)小麥分子遺傳實驗室Liuling Yan教授和Brett F. Carver教授為通訊題為“TaCol-B5 modifies spike architecture and enhances grain yield in wheat”的研究論文。該研究克隆了一個CONSTANS-like家族基因,TaCOL-B5,該基因?qū)π∷霐?shù)、分蘗數(shù)以及單株產(chǎn)量等性狀都有明顯的調(diào)控作用,田間測產(chǎn)顯示該基因?qū)π←溤霎a(chǎn)有極顯著的促進(jìn)作用。


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該實驗室在前期研究中通過CItr 17600 和揚(yáng)麥18兩個品種的雜交構(gòu)建了一個F2代群體,并使用圖位克隆的方法在染色體Chr7B上鑒定到一個主效QTL(QSns.osu-7B),能夠解釋群體中43%的SNS表型分離(圖1A)。為了克隆該基因,該實驗室從1857個F5代植株中篩選到了4個關(guān)鍵的重組體植株,并根據(jù)其子代的SNS 分離情況,將候選基因限制在兩個分子標(biāo)記(SNS-M1 和 SNS-G2M3)之間,約為318,786 bp的區(qū)域。在該區(qū)域存在兩個候選基因:TraesCS7B02G400600和 TraesCS7B02G400700(圖1B)。


通過序列分析發(fā)現(xiàn),TraesCS7B02G400700基因編碼區(qū)以及其可能的啟動子區(qū)在兩親本間不存在序列差異;然而TraesCS7B02G400600基因編碼區(qū)在兩親本間存在多個SNP位點(diǎn),推測該基因參與調(diào)控SNS性狀的可能性較大。由于TraesCS7B02G400600編碼了一個CONSTANS-like蛋白,與植物中的COL5基因同源,因此命名為TaCOL-B5。為驗證其功能,該實驗室通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)過表達(dá)其顯性等位基因TaCol-B5后獲得4個獨(dú)立的轉(zhuǎn)基因植株,然后在溫室和田間條件下對子代的轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行種植并發(fā)現(xiàn)該基因的過表達(dá)能夠增加小穗數(shù)和穗長,對小麥籽粒產(chǎn)量有顯著促進(jìn)作用(圖1C)。


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圖1 A調(diào)控小穗發(fā)育的主效QTL QSns.osu-7B定位于小麥Chr7B染色體上;B通過分子標(biāo)記篩選,得到4個關(guān)鍵重組體植株(F5代);C-F P11-58、P19-236、P11-63和P19-1121的F6代重組體株系中小穗數(shù)(SNS)表型分離。

 

為驗證這一發(fā)現(xiàn),該實驗室在田間條件下對轉(zhuǎn)基因株系進(jìn)行了連續(xù)兩年的種植,對產(chǎn)量性狀相關(guān)表型進(jìn)行驗證(圖2)。結(jié)果顯示,揚(yáng)麥18的4個TaCol-B5過表達(dá)株系比非轉(zhuǎn)基因揚(yáng)麥18產(chǎn)量平均增長了11.9%,增產(chǎn)效果最為顯著的一個株系產(chǎn)量提高19.8%。在以往克隆的小麥產(chǎn)量性狀相關(guān)基因中,尚沒有哪個單基因?qū)λ氩堪l(fā)育和籽粒產(chǎn)量具有如此顯著的作用效果。


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圖2 (A)溫室條件下非轉(zhuǎn)基因植株與TaCol-B5過表達(dá)株系間存在明顯的表型差異,過表達(dá)株系和對照植株在SNS表型(B)和每穗粒數(shù)(C)均有顯著差異;D 田間條件下T2代TaCol-B5過表達(dá)株系與非轉(zhuǎn)基因植株間存在明顯的表型差異,過表達(dá)株系和對照植株在SNS(E)、穗長(F)、每穗粒數(shù)(G)和每株穗數(shù)(H)上均存在顯著差異;I-J田間條件下T3代TaCol-B5過表達(dá)株系與非轉(zhuǎn)基因植株間存在的表型差異仍然非常明顯。


該實驗室進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),TaCol-B5受到絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶TaK4的磷酸化而激活,TaCol-B5的Ser269為TaK4作用的磷酸化位點(diǎn)(圖3),這是首次發(fā)現(xiàn)TaK4磷酸激酶能夠調(diào)節(jié)穗部發(fā)育和產(chǎn)量性狀。該實驗室又通過基因編輯對Tacol-B5功能域進(jìn)行堿基敲除,在兩株編輯成功植株Tacol-B5-ED1和Tacol-B5-ED12的CCT功能域中分別引入1個堿基和7個堿基缺失突變。在溫室條件下,Tacol-B5-ED1和Tacol-B5-ED12的T1代堿基敲除株系與對照相比,表現(xiàn)出了開花期延遲和株高減少的特性,該表型進(jìn)一步驗證了TaCol-B5的功能。


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圖3A酵母雙雜實驗證明顯性等位基因編碼蛋白TaCol-B5與TaK4存在互作;B TaCol-B5和Tacol-B5氨基酸序列存在三個氨基酸位點(diǎn)的差異,標(biāo)紅部分為有可能被磷酸化的位點(diǎn);C 磷酸化實驗證明TaCol-B5能夠被TaK4磷酸化。


TaCol-B5是通過自然突變產(chǎn)生的顯性等位基因,該等位基因在目前世界范圍內(nèi)種植的普通小麥品種中出現(xiàn)頻率非常低,這也是該基因很難被發(fā)現(xiàn)的原因之一。該基因的發(fā)現(xiàn)對于深入了解小麥產(chǎn)量性狀基因的作用機(jī)制具有里程碑式的意義,使我們對小麥增產(chǎn)機(jī)制有了更深入的理解。


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圖4 通過基因編輯對Tacol-B5進(jìn)行堿基敲除,在兩株編輯成功植株中分別引入1個堿基和7個堿基缺失突變(A和B);與對照相比,兩個堿基缺失株系在開花期(C和D)和株高(E和F)上差異顯著;不同CCT蛋白家族結(jié)構(gòu)比較(G和H)


俄克拉荷馬州立大學(xué)小麥分子遺傳實驗室Liuling Yan教授和Brett F. Carver教授為該文通訊作者。第一作者包括:該實驗室畢業(yè)生張小雨博士(現(xiàn)供職于中國農(nóng)科院麻類所南方經(jīng)濟(jì)作物研究中心),賈海燕教授(現(xiàn)供職于南京農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院)和李甜副研究員(現(xiàn)供職于中國農(nóng)科院作物科學(xué)研究所)。

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