行業(yè)資訊

    測(cè)定一種農(nóng)藥藥劑的藥效好壞，可通過室內(nèi)毒力測(cè)定和林間藥效試驗(yàn)。室內(nèi)毒力測(cè)定主要是測(cè)定一種藥劑的毒性、毒力或比較幾種藥劑毒力的大小。室內(nèi)試驗(yàn)的結(jié)果，除可作為藥劑的初步篩選的根據(jù)外，還可為林間試驗(yàn)提供參考。有時(shí)在林間發(fā)現(xiàn)的問題必須拿回室內(nèi)作比較精細(xì)的試驗(yàn)研究。林間試驗(yàn)主要測(cè)定或比較藥劑在林間條件下的藥效，其結(jié)果比較接近實(shí)際情況，為生產(chǎn)防治提供可靠的依據(jù)。

    1．室內(nèi)毒力測(cè)定

    進(jìn)行室內(nèi)試驗(yàn)要注意：①供試生物應(yīng)該是由同一環(huán)境下培養(yǎng)得來的，或采自林間同一環(huán)境的，在生理、發(fā)育上愈一致愈好。②供試藥劑必須純凈（原油或原粉），至少要有確切的有效成分含量。③在控制的條件下進(jìn)行試驗(yàn)，施藥要均勻一致。④試驗(yàn)一般要求每種處理有3－5個(gè)重復(fù)，每個(gè)處理要有50－100頭昆蟲（菌類孢子一般為在顯微鏡10×10視野內(nèi)有100個(gè)左右，每次計(jì)算必須移動(dòng)玻片檢查3次）。⑤各種試驗(yàn)必須設(shè)立對(duì)照。所設(shè)對(duì)照有：完全不處理的（在自然狀況下的），即所謂“空白”對(duì)照；不含有效成分的制劑或清水對(duì)照，用標(biāo)準(zhǔn)藥劑處理的對(duì)照。

    （1）殺蟲劑的毒力測(cè)定方法

    1）噴霧法：模擬林間實(shí)際防治情況下而設(shè)計(jì)的噴霧方法，為了減少試驗(yàn)誤差，使每一個(gè)供試?yán)ハx盡量接受到相同的藥量，要求噴霧器有一定的壓力，使霧點(diǎn)大小一致，噴霧均勻。

    2）液浸法：將供試?yán)ハx分別放入不同濃度的稀釋藥液中浸漬一下，立即取出，放在吸水紙上吸去過多的藥液，移入每一組的盛器中，給以新鮮葉片作飼料，盛器上加蓋紗布或紗網(wǎng)，飼養(yǎng)于室內(nèi)，記錄室溫，觀察不同時(shí)間下中毒死亡情況。

    3）藥膜法：將藥劑噴撒在一定面積的表面上，形成一層均勻的藥膜（常用墊有濾紙的培養(yǎng)皿，或?qū)⑨樔~在藥液中浸漬一下后取出），然后讓供試的害蟲在上面，任其與藥膜接觸一定時(shí)間后，再移回正常的容器中飼養(yǎng)，或就在接觸藥膜過程中，觀察中毒死亡情況。

    4）點(diǎn)滴法：用定量的藥液微滴，滴加在供試?yán)ハx的胸部背面，然后定時(shí)觀察中毒死亡情況。此法優(yōu)點(diǎn)是：劑量可用每克蟲體接受的藥量（常用微克）表示，藥量容易控制，試驗(yàn)誤差較??；缺點(diǎn)是費(fèi)時(shí)，處理所用的溶劑、點(diǎn)滴的部位和液滴的大小等都可影響毒力。在采用本法時(shí)，應(yīng)當(dāng)考慮這些因素，盡量取得一致，才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。

    （2）殺菌劑的毒力測(cè)定方法

    1）孢子萌發(fā)測(cè)定法：將不同的藥液噴布于玻片表面或平板上，定量滴加孢子懸浮液，藥液接觸后，經(jīng)一定培養(yǎng)時(shí)間，鏡檢孢子萌發(fā)的百分率。

    2）抑菌圈法：將病原菌孢子或菌絲的懸浮液與瓊脂培養(yǎng)基混勻，冷凝后，在培養(yǎng)基平面放上消毒的并蘸有不同濃度藥液的圓形濾紙片（直徑6毫米左右），經(jīng)定溫培養(yǎng)一定時(shí)間后，由于藥液的擴(kuò)散作用，使病菌生長(zhǎng)受到抑制，即形成“抑制圈”。測(cè)量抑制圈的大小，以比較殺菌劑的毒力。

    3）生長(zhǎng)速率測(cè)定法：在瓊脂培養(yǎng)基中加入藥液，冷凝后接菌的方法，經(jīng)24－48小時(shí)后，觀察菌落生長(zhǎng)情況，計(jì)算生長(zhǎng)速率，并與不含藥劑的對(duì)照組生長(zhǎng)速度相比較。

    （3）殺蟲劑、殺菌劑的毒力表示方法：藥劑的殺蟲或殺菌毒力，常用“致死中量”表示，即殺死生物種群半數(shù)（50%）所需用的劑量（median lethal dose，毫克/千克）常簡(jiǎn)寫為L(zhǎng)D50。如果濃度表示劑量，則為“致死中濃度”，簡(jiǎn)寫為L(zhǎng)C50。殺菌劑則以ED50或EC50來表示，即抑制50%孢子萌發(fā)所需的劑量或濃度。

    在測(cè)定藥劑毒力時(shí)，一般常用一系列的劑量（或濃度）對(duì)多組生物分別測(cè)定死亡百分率，再以不同劑量與相應(yīng)的死亡率畫成“劑量－死亡率毒力曲線”。在縱坐標(biāo)從死亡率50%處引出一平行于橫坐標(biāo)的線與曲線相交。該處的劑量（或濃度）即為L(zhǎng)D50（或?yàn)長(zhǎng)C50）。但是由于這一曲線是S形的，不易精確地求得LD50或LC50的數(shù)值，同時(shí)用S形曲線也不易與其他曲線進(jìn)行比較。因此，必須把這一呈S形曲線改成一條直線，常用統(tǒng)計(jì)方法是將劑量用對(duì)數(shù)值表示，將死亡率用機(jī)率值表示，就可以將S形曲線改為一根直線，這一根直線常稱“劑量對(duì)數(shù)-機(jī)率值直線”。死亡率查機(jī)率（見附表2機(jī)率與死亡百分率換算表）。從這一直線的坡度，還可得知供試生物對(duì)該種藥劑敏感性差異的程度，即坡度越大，表示供試生物個(gè)體間差異越??；坡度越小，表示差異越大。

    室內(nèi)毒力測(cè)定時(shí)，在不施藥的對(duì)照組中，出常出現(xiàn)少數(shù)自然死亡的個(gè)體，如果自然死亡率在5%以下，一般僅把處理組的死亡率減去自然死亡率即可得到校正死亡率。當(dāng)自然死亡率達(dá)到5%~20~時(shí)，就不能用直接相減的方法，應(yīng)按照下列公式計(jì)算處理組的校正死亡率，如果自然死亡率超過20%時(shí)，則該批供試生物不宜作試驗(yàn)或試驗(yàn)應(yīng)重做。

    對(duì)照組生存率－處理組生存率

    處理組的校正死亡率(%)=---×100%

    對(duì)照組生存率

    2．林間藥效試驗(yàn)

    林間藥效試驗(yàn)的小區(qū)或大區(qū)的面積大小，取決于地形條件、林木種類、病蟲習(xí)性和試驗(yàn)要求。用藥處理前后，必須調(diào)查病蟲害為害程度的變化，通常采用“隨機(jī)取樣” 方法調(diào)查，常有對(duì)角線法、大五點(diǎn)法、棋盤式法、平行線法、分行法等。病蟲害發(fā)生比較普遍，分布比較均勻，危害較重，可采用五點(diǎn)取樣法或棋盤式法；病蟲害分布不均衡，形成大小及形狀不相同的核心分布型，并自核心向外放射性蔓延，可采用平行線法。取樣大?。ㄈ鐦?biāo)準(zhǔn)株數(shù)）直接關(guān)系到結(jié)果的正確程度，應(yīng)根據(jù)具體條件、病蟲種類等情況，決定取樣大小。例如調(diào)查金毛蟲蟲口密度時(shí)，蟲口密度大的，抽標(biāo)準(zhǔn)株數(shù)少些；蟲口密度小的，抽標(biāo)準(zhǔn)株數(shù)多些，一般約20－30株。

    藥效試驗(yàn)結(jié)果，最常用的是害蟲死亡率、蟲口減退率、枯梢率等。病害試驗(yàn)結(jié)果可用發(fā)病率、普遍率、感染指數(shù)等表示。一般當(dāng)害蟲蟲口密度基本上是一定的，則處理后的蟲口數(shù)一定減少，而不會(huì)增加。對(duì)這類害蟲試驗(yàn)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)，只要計(jì)算死亡率或蟲口減退率即可。

    害蟲死亡率（或蟲口減退率）（%）

    施藥前害蟲平均活蟲數(shù)—施藥后害蟲平均活蟲數(shù)

    =----×100%

    施藥前害蟲平均活蟲數(shù)

    當(dāng)自然死亡率在5%－20%，應(yīng)進(jìn)行校正。為此，在試驗(yàn)設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)加不施藥的對(duì)照區(qū)，這樣就能計(jì)算校正死亡率或校正蟲口減退率。

    害蟲校正死亡率

    施藥區(qū)死亡率（減退率）－不施藥對(duì)照區(qū)死亡率（減退率）

    =--- ×100%

    100－不施藥對(duì)照區(qū)死亡率（減退率）

    另一類害蟲（主要是蚜、螨）。它們的繁殖力很加，不僅對(duì)照區(qū)蟲口數(shù)要比施藥前增加，就是施藥區(qū)的蟲口數(shù)也有減有增。因此，運(yùn)用上述校正死亡率或校正蟲口減退率（%）公式時(shí)，凡遇不施藥對(duì)照區(qū)蟲口數(shù)增加的，則在公式中改用“+”號(hào)。

    殺菌劑藥效試驗(yàn)的調(diào)查及結(jié)果的處理方法也因病害種類、危害性質(zhì)而異。如苗期病害，可隨機(jī)或定點(diǎn)取樣，檢查一定數(shù)量的苗株，計(jì)算發(fā)病率。根據(jù)施藥前、后的發(fā)病率，計(jì)算病害減退率或防治效果。

    病苗（株、葉、稈）數(shù)

    發(fā)病率（或普遍率）（%）= ---×100%

    檢查苗（株、葉、稈）數(shù)

    有些病害如落針病、葉斑病等，因同一植株上或不同植株上危害程度有輕重之別，可根據(jù)落針數(shù)或葉上的病斑數(shù)，分成若干等級(jí)，例如分為0、1、2、3、4、5等六級(jí)，級(jí)數(shù)可按具體情況或多或少。分別檢查藥劑防治區(qū)別和不施藥對(duì)照區(qū)的各級(jí)病葉數(shù)，計(jì)算防治區(qū)和對(duì)照區(qū)的病指情指數(shù)。計(jì)算方法如下：

    ∑（級(jí)別代表值×本級(jí)病株數(shù)）

    病情指數(shù)（或感病指數(shù)）（%）=---×100%

    檢查總株數(shù)×最高級(jí)別代表值

    式中：∑是各級(jí)乘積數(shù)值的總和。

    用病情指數(shù)進(jìn)一步計(jì)算防治效果：

    對(duì)照區(qū)病情指數(shù)（或發(fā)病率）－防治區(qū)病情指數(shù)（或發(fā)病率）

    防治效果（%）=---×100%

    對(duì)照區(qū)病情指數(shù)（或發(fā)病率）

    關(guān)于除草劑的除草效果可用下式計(jì)算：

    對(duì)照區(qū)雜草數(shù)量（鮮重，克）－施藥區(qū)雜草殘留量（鮮重，克）

    防治效果（%）=---×100%

    對(duì)照區(qū)雜草數(shù)量（鮮重，克）