行業(yè)資訊

    6月5日,據(jù)福建檢驗(yàn)檢疫局透露,該局自主研發(fā)的“轉(zhuǎn)基因大豆2704-12(品系)的LAMP檢測(cè)引物及方法”獲國家發(fā)明專利授權(quán),這是福建檢驗(yàn)檢疫局自主研發(fā)的的并在轉(zhuǎn)基因檢測(cè)領(lǐng)域獲得的首個(gè)專利。目前,這項(xiàng)技術(shù)已作為檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)(SN/T 3767.15-2014),在國內(nèi)轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)中進(jìn)行推廣應(yīng)用。

    據(jù)福建檢驗(yàn)檢疫局相關(guān)專家介紹,轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系是國家農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)允許進(jìn)口,并在進(jìn)口時(shí)必須開展符合性驗(yàn)證檢測(cè)的一種品系。國內(nèi)外還未見轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系LAMP檢測(cè)引物及方法的報(bào)道。此次福建檢驗(yàn)檢疫局自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因大豆檢測(cè)方法,首次設(shè)計(jì)、篩選到了轉(zhuǎn)基因大豆A2704-12品系的LAMP檢測(cè)引物,并建立普遍適用于基層實(shí)驗(yàn)室的轉(zhuǎn)基因大豆2704-12品系LAMP檢測(cè)方法。

    該方法具有高效、簡(jiǎn)便、高特異性等特點(diǎn):

    一是高效：LAMP方法只需要恒溫就能完成擴(kuò)增反應(yīng),沒有PCR反應(yīng)中那樣循環(huán)溫模板的變性、退火、復(fù)性過程,因此可將PCR法的2-3小時(shí)的擴(kuò)增時(shí)間縮短至約1小時(shí),即能擴(kuò)增出109~1010倍靶序列拷貝,DNA產(chǎn)量高達(dá)500ug/mL,且能檢測(cè)到的拷貝數(shù)低至PCR檢測(cè)限的1/10。

    二是簡(jiǎn)便：因LAMP的恒溫?cái)U(kuò)增和產(chǎn)物直觀檢測(cè)的特點(diǎn)使其只要一個(gè)簡(jiǎn)單的恒溫器,無需昂貴的檢測(cè)設(shè)備,有利于對(duì)現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)或基層實(shí)驗(yàn)室推廣應(yīng)用。

    三是高特異性：采用六個(gè)區(qū)段、六條引物對(duì)靶DNA序列進(jìn)行擴(kuò)增,決定了LAMP法的特異性高于只用1對(duì)引物進(jìn)行擴(kuò)增的PCR法。

    據(jù)悉,目前檢測(cè)轉(zhuǎn)基因特異品系的方法主要有普通PCR方法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。普通PCR方法耗時(shí)長(zhǎng),操作繁瑣,靈敏度不夠,容易交叉污染,質(zhì)控復(fù)雜,假陽性、假陰性比例偏高。實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法靈敏度高,但成本昂貴,技術(shù)要求高,且必須使用大型儀器設(shè)備。

    此次福建運(yùn)用LAMP這種新穎的恒溫核酸擴(kuò)增方法,在轉(zhuǎn)基因特異品系檢測(cè)領(lǐng)域有效建立了普遍適用于檢驗(yàn)檢疫一線基層實(shí)驗(yàn)室的快速、簡(jiǎn)便、高效的轉(zhuǎn)基因品系檢測(cè)方法,檢測(cè)成本遠(yuǎn)低于熒光定量PCR。